首先明确，当一个蛋白中少数几个氨基酸改变，一般来说蛋白质仍是正常的可能性比举枝较大。但是如果大多数氨基酸都改变，则蛋白质就不正常了。再看“非重叠性”，他的意思是，一个碱基只阅读一次。比如序列AGAUCU，只有两个密码子：AGA、UCU。如果是重叠性，假设是重叠两位的情况，则有可能有4个密码子：AGA、GAU、AUC、UCU。此时，你加入一个密码子，比如插入一个G变成：GAGAUCU，则非重叠密码子变为：GAG、AUC、还有后面的；重叠性的话，密码子变为GAG、AGA、GAU、AUC、UCU。可以看到，非重叠性的话，密码子完全改正弊敏变卜拍；如果是重叠性，则只有少数几个密码子改变，后面的都不变。所以，对于一个很长的mRNA链来说，实验中插入一个碱基，改变了其后几乎所有的密码子，蛋白失去功能，则证明了是非重叠性的。
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